尺寸排阻色譜法(SEC)是根據(jù)溶液中分子的大小分離化合物的,在柱子的填料中較大的分子會被較細的小孔排除在外。尺寸排阻色譜是根據(jù)溶液中分子量大小分離的,其保留時間取決于溶質(zhì)分子進出固定相孔結(jié)構(gòu)的相對滲透度。
尺寸排阻色譜柱采用單分散、球形、表面鍵合了一層納米厚度中性親水性薄膜的3μm硅膠作為填料。3μm的粒徑結(jié)合大的孔體積使其成為目前分辨率優(yōu)良的體積排阻柱。表面鍵合技術(shù)保證了填料表面鍵合的很大化,使其具有高的化學(xué)穩(wěn)定性及小的非特異性吸附。尺寸排阻色譜柱體積排阻柱有100、150及300三種孔徑選擇,廣泛的應(yīng)用于生物分子及水溶性聚合物的分離與分析。
尺寸排阻色譜柱多次使用后某些樣品可能會吸附到入口篩板或填料上,當(dāng)積累至一定程度時會出現(xiàn)壓力升高并伴隨峰型展寬的現(xiàn)象,此時需要清洗色譜柱。一般流程為:斷開檢測器,反接色譜柱,在低于50%較大推薦流速下用清洗液沖洗10-15倍柱體積。