離子色譜柱老化的目的在于去除固定相表面不穩(wěn)定的固定相流失碎片或污染物,讓離子色譜柱為即將進行的分析做好準備。通常,新柱初次使用、離子色譜柱放置一段時間后再次使用、或離子色譜柱受到一定污染或損傷后都需要進行適當?shù)睦匣?/div>
離子色譜柱老化的一般步驟:
1.首先使所有加熱部位(如進樣口和檢測器)降溫;
2.將切割好的毛細管柱接到進樣口,開通載氣并保持適當流速,將色譜柱出口端插入盛有甲醇或乙醇的燒杯,正常情況下應能夠觀察有連續(xù)的氣泡冒出,否則應及時檢查是否有漏氣、色譜柱斷裂、或進樣口參數(shù)設置;
3.用6倍柱體積(或吹掃約15min)的載氣吹掃色譜柱以排除柱內(nèi)可能存在的O2
4.關閉爐箱,緩慢升溫至已知分析方法的溫度+20°C或色譜柱恒溫溫度上限-20°C后繼續(xù)老化2個小時;
離子色譜柱老化的注意事項:
·老化的溫度一般不要超過色譜柱的恒溫溫度上限,初次老化可以升溫至色譜柱使用溫度(程序升溫溫度上限)老化一段時間,建議不超過10min;
·對于強極性色譜柱(如聚乙二醇固定相),建議采用較緩的程序升溫,如5°C/min。
值得注意的是,離子色譜柱只要存在極小的劃痕或者聚酰亞胺保護層被破損,熔融石英柱就會斷裂。柱箱的連續(xù)加熱及冷卻,柱箱風扇導致的振動,以及纏繞在圓形柱架上都會對柱管施加應力。在這些應力的持續(xù)作用下,裂縫將會出現(xiàn),直到發(fā)生斷裂。
注意:大口徑的色譜柱(內(nèi)徑為0.45-0.53mm)更易于斷裂。
避免斷裂
不要讓離子色譜柱接觸尖銳的邊角。比如:柱架和標簽、色譜柱柱箱的金屬邊緣、柱切割器實驗臺上的其他物品,以避免劃痕和破損。
避免太緊地纏繞或彎曲色譜柱。
恢復
若一根斷裂的色譜柱已經(jīng)被加熱,很可能就破壞了固定相。丟棄斷裂的一段色譜柱(無載氣通過的一段),從柱端切割掉6英寸,再進行安裝。
若斷裂的柱子未被加熱,采用小體積接頭將兩段色譜柱連接起來。對于一根柱子,連接頭不能超過2-3個。
超過色譜柱溫度極限將加速固定相和管表面的降解。這將會導致過早的柱流失、活性化合物的峰拖尾和/或柱效下降(分離度下降)。
預防
不要超過的柱溫上限。
--等溫上限:柱子能夠無限期承受的溫度。
--程序升溫限:色譜柱只能在此溫度下工作5-10分鐘。
恢復
將色譜柱從檢測器上拆開。
在等溫上限溫度條件下加熱色譜柱8-16個小時。
從柱端截去10-15厘米。
將柱子重新安裝于檢測器上,按正常條件老化。
●注意:熱損壞是不可逆的。色譜柱通常不能恢復至初始性能;但是,色譜柱仍然可用。熱損壞之后,色譜柱的壽命將縮短。