要提高液相色譜的效率可從以下幾方面入手。 以下介紹了幾種上流行的測量和計算柱效值的方法。

1、提高液相色譜柱柱效的方法

要提高液相色譜的效率可從以下幾方面入手。

（1）降低移動相的流速，但會使分析時間延長。

（2）減少固定相的量，但色譜柱中樣品的負載量也隨之減小。

（3）減小固定相的顆粒度，但不能過分，過分后色譜柱的滲透率也會減小。

（4）選用低粘度的移動相，以利于快速傳質(zhì)，但卻不利于多組份分析。

（5）適當(dāng)提高柱溫，可降低移動相的粘度，但柱效和分離度也隨之降低。

（6）盡量減小停滯移動相的體積，但卻加快了移動相的流速。

從以上介紹可看出，在色譜分析過程中，各種因素是互相和制約的。只有通過對柱效值的跟蹤測算，對自己分析方法不斷的研究和實踐，才能找到*的工作條件。

2、對柱效值進行跟蹤測算應(yīng)注意的問題

我們也應(yīng)記住柱效值并不足以預(yù)測在所有條件下的柱性能，對大多數(shù)色譜工作者來說，柱性能指的是色譜柱用于特定分離的能力，而僅僅有高柱效并不能保證這種分離能力。

不管用什么特定的測試方法，都會有幾個參數(shù)影響柱效的測定。這些參數(shù)包括：洗脫液的成分和粘度及其線流速，測定塔板數(shù)所用的溶質(zhì)，溫度，柱長，填料裝填方式，顆粒度，還有所選用的測量和計算方法。而測量和計算方法對柱效值的確定起著極大的作用。

3、幾種測量和計算柱效值的方法

因為色譜峰是假定樣品濃度在移動相和固定相中呈正態(tài)分布而得到的樣品譜帶分布，故常常把色譜峰型看作正態(tài)曲線來計算理論塔板數(shù)。因此計算柱效（以理論塔板數(shù)n為單位）的公式習(xí)慣上定義為：

式中tR為色譜峰的保留時間;σ2是以時間為單位測量色譜峰的偏差;a是和峰高（從測峰寬的基線量起）有關(guān)的常數(shù)，ωb是峰寬，表示由色譜峰頂點與色譜峰兩側(cè)拐點處做切線與峰底基線相交兩點間的距離。

4、結(jié)論

假如一個色譜峰真是正態(tài)峰型，那么每種計算方法都會得到同樣的結(jié)果。然而即使一些比較理想的儀器和傾向于得到對稱峰型的溶質(zhì)，由于柱內(nèi)的槽或空隙，也會出現(xiàn)非正態(tài)峰型。所以不同的計算方法將會得到相差較大的n值。通常偏離正態(tài)模型的峰型表示為“前延”或“拖尾”。對于這些峰型，越在峰的高處測量，計算的理論塔板數(shù)值就越大（準確性越低）。在許多情況下，色譜工作者需要能反映整個峰型（包括拖尾）的柱效值，同時為了保證定量的重復(fù)性，也需要色譜峰很好的對稱性。這時對色譜峰非對稱性zui敏感的計算方法。如果目的僅僅是要監(jiān)測色譜柱從*次使用到使用壽命結(jié)束這一過程中的柱效，那么以上任何一種方法都可以，應(yīng)選擇zui簡便的方法。

如何提高氣相色譜柱柱效？

在實際工作中，我們通過對載氣流速、進樣技術(shù)、氣化室溫度、色譜柱、柱溫、檢測器溫度這六個方面的選擇，有效地提高了柱效率，使分析出的色譜峰峰形正常，無峰形擴張、拖尾、峰漏檢等不良現(xiàn)象出現(xiàn)，分離度高，從而提高了分析結(jié)果的準確性。

所為柱效就是在較短的時間內(nèi)，用較短的柱子達到滿意的分析結(jié)果。為了提高色譜柱的柱效率，減少色譜峰擴張、拖尾及峰漏檢等現(xiàn)象，在實際工作中，我們從以下六個方面入手，對柱操作條件的選擇進行了探討。

1、載氣流速的選擇

氣相色譜zui常用的載氣是：氫氣、氮氣、氬氣、氦氣。

由速率理論可知，載氣流速慢有利于傳質(zhì)，有利于組分的分離，但分析時間會加長；如果載氣流速快有利于加快分析速度，減少分了擴散，但分離度降低。有時為了縮短分析時間，加大流量，但此時分離效果并不好?？梢娸d氣流速的快慢都會降低柱效。經(jīng)過長時間的實驗，發(fā)現(xiàn)對于一般色譜儀而言，載氣流量為20-100ml/min。目前我們分析液化氣用的是熱導(dǎo)檢測器，載氣用的是氫氣，其流量控制是30 ml/min。分析戊烷發(fā)泡劑用的是氫火焰離子化檢測器，載氣用的是氮氣、燃燒氣氫氣和氧氣，這三種氣體的體積比是氮氣：氫氣：氧氣為1：1：10，分析效果都是較好的。

2、進樣技術(shù)的選擇

在氣相色譜分析中，一般采用注射器或六通閥門進樣。在考慮進樣技術(shù)的時候，以注射器進樣為主來研究。

進樣量：如果在進樣過程中進樣量大會導(dǎo)致：分離度小；保留值變化難于定性；峰高和峰面積與進樣量不成線性關(guān)系，不能定量。進樣量與氣化溫度、柱容量和儀器的線性響應(yīng)范圍等因素有關(guān)。進樣量應(yīng)控制在瞬間氣化，達到規(guī)定分離要求和線性響應(yīng)的允許范圍內(nèi)。填充柱沖洗法的瞬間進樣量：液體樣品或固體樣品溶液一般為0.01——10μl,氣體樣品一般為0.11——10ml,在定量分析中，應(yīng)注意進樣量讀數(shù)準確。

注射器里空氣的排除：用微量注射器抽取液體樣品，只要重復(fù)地把液體抽入注射器又迅速把其排回樣品瓶，就可以將空氣排除。還有一種更好的方法，那就是用計劃注射量的約2倍的樣品置換注射器3——5次，每次取到樣品后，垂直拿起注射器，針尖朝上，留在注射器里的空氣都應(yīng)當(dāng)跑到針管頂部，推進注射器塞子，空氣就會全部被排掉。

保證進樣量的準確：用經(jīng)置換過的注射器取約計劃進樣量2倍左右的樣品，垂直拿起注射器，針尖朝上，讓針穿過一層紗布，這樣可用紗布吸收從針尖排出的液體。推進注射器塞子，直到讀出所需要的數(shù)值。用紗布擦干針尖。至此準確的液體體積已經(jīng)測得，需要再抽若于空氣到注射器里。如果不慎推動柱塞，空氣可以保護液體使之不被排走。

進樣手法：雙手拿注射器。用一只手（通常是左手）扶針插入墊片，注射大體積樣品（即氣體樣品）或柱前壓力*時，要防止從氣相色譜儀注樣器來的壓力把注射器活塞彈出（即用右手的大拇指按壓住活塞頂部）。讓針尖穿過墊片盡可能深的進入進樣口，壓下注射器活塞停留1秒鐘，然后盡可能快而穩(wěn)地抽出針尖（抽出的同時繼續(xù)壓住注射器活塞）。

進樣時間：進樣時間長短對柱效率影響很大。若進樣時間過長，遇使色譜區(qū)域加寬而降低柱效率。因此，對于沖洗法色譜而言，進樣時間越短越好，一般必須小于1秒鐘。

3、氣化室溫度的選擇

氣化室溫度取決于樣品的化學(xué)和熱穩(wěn)定性、沸程范圍、進樣口類型等。合適的氣化室溫度即能保持樣品瞬間*氣化，又不引起樣品分解。溫度過低，氣化速度比較慢，使峰形不規(guī)則，出現(xiàn)平頭峰或伸舌峰；溫度過高使出峰數(shù)目變化，產(chǎn)生前延峰，甚至樣品分解。為選擇合適的氣化室溫度，在多次的進樣中我們發(fā)現(xiàn)，氣化室溫度比柱溫高50-100℃或比樣品組分中zui高沸點高50-70℃較為合適。溫度過高過低都會影響柱效。